Abstract The relocation of epiphytes contributes to biodiversity conservation. In this sense, studies that aim to promote the success of the process are necessary. Therefore, the objective of this work was to analyze the effects of initial fresh mass and fertilization on the propagation of two species of Rhipsalis, thus ensuring their success after relocation to a protected area. Therefore, fertilized and unfertilized plants of Rhipsalis puniceodiscus and Rhipsalis trigona initially with one or two cladodes were propagated in a greenhouse for 25 months. After relocation to a forest area, their survival was monitored for 16 months. Survival percentage, shoot length and root length were analyzed every four months. Fresh mass, dry mass and photosynthetic pigment were analyzed before relocating to a native forest. During the protected propagation stage, for both species, individuals presenting more branches and those that were fertilized exhibited more intense overall development. The propagation of R. puniceodiscus and R. trigona in a greenhouse with two cladodes is better than with one cladode. In general, R. puniceodiscus displayed better development under controlled conditions than R. trigona. Propagation using fertilization increased fresh mass and favors growth and survival rate of R. puniceodiscus and R. trigona. It is possible to relocate both species to a preserved area of the Atlantic Forest, but R. trigona presented more potential.

Resumo A realocação de epífitas contribui para a conservação da biodiversidade. Neste sentido, estudos que visem promover o sucesso do processo são necessários. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi analisar os efeitos da massa fresca inicial e da fertilização na propagação de duas espécies de Rhipsalis, garantindo assim o seu sucesso após a realocação para uma Unidade de Conservação. Para tanto, plantas fertilizadas e não fertilizadas de Rhipsalis puniceodiscus e Rhipsalis trigona inicialmente com um ou dois cladódios foram propagadas em casa de vegetação por 25 meses. Após a mudança para uma área de floresta, sua sobrevivência foi monitorada por 16 meses. A porcentagem de sobrevivência, comprimento da parte aérea e comprimento da raiz foram analisados a cada quatro meses. Massa fresca, massa seca e pigmento fotossintético foram analisados antes de realocar para uma floresta nativa. Na fase de propagação protegida, para ambas as espécies, os indivíduos com mais ramos e os que foram fecundados exibiram um desenvolvimento global mais intenso. A propagação de R. puniceodiscus e R. trigona em casa de vegetação com dois cladódios é melhor do que com apenas um cladódio. Em geral, R. puniceodiscus apresentou melhor desenvolvimento em condições controladas do que R. trigona. A propagação com fertilização aumenta a massa fresca e favorece o crescimento e a taxa de sobrevivência de R. puniceodiscus e R. trigona. É possível realocar ambas as espécies para uma área preservada da Floresta Atlântica, porém R. trigona se apresentou mais promissora no processo.

RESUMO A Mata Atlântica é um bioma constantemente ameaçado por perturbações antrópicas. A supressão da vegetação por obras rodoviárias ressalta a necessidade de projetos de conservação das espécies que nela ocorrem. O sucesso do resgate e realocação de plantas, como a palmeira Syagrus romanzoffiana pode contribuir para a conservação dessas espécies. O objetivo deste trabalho foi estudar o crescimento de mudas de S. romanzoffiana resgatadas de áreas de supressão da obra do Rodoanel Mário Covas - Trecho Norte e transplantadas em áreas naturais do Parque Estadual da Cantareira, São Paulo -SP. Foram obtidas medidas de altura, diâmetro do coleto, número de folhas e volume do torrão das mudas. O transplante foi realizado em três condições de luminosidade depois de separadas em três classes de volume de torrão e três classes de diâmetro do coleto. Foram avaliadas a porcentagem de sobrevivência, incremento em altura, diâmetro do coleto, número de folhas e pigmentos fotossintéticos após 4, 8 e 12 meses. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 x 3 x 3 (luminosidade x diâmetros do coleto x volumes do torrão) com três repetições de cinco plantas cada. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas entre si através do teste de Tukey (5%). A sobrevivência foi superior a 80% em todos os ambientes. Houve maior crescimento, principalmente quanto ao diâmetro do coleto, na clareira pequena. A quantificação de clorofila a, b e carotenoides mostrou maior teor para as plantas mantidas no sombreamento. Quanto à razão clorofila a/b, os resultados evidenciaram maiores valores nas plantas mantidas no sombreamento, com valores crescentes até os 12 meses. Pode-se concluir que S. romanzoffiana apresenta pouca restrição quanto ao ambiente de realocação, porém, com preferência às clareiras pequenas, sendo dispensável que sejam realocadas com torrão de porte grande.

ABSTRACT The Atlantic Forest is a biome constantly threatened by human disturbances. The suppression of vegetation by road works highlights the need for conservation projects for the species that occur there. The success of rescuing and relocating plants, such as the Syagrus romanzoffiana palm, can contribute to the conservation of these species. The objective of this work was to study the growth of S. romanzoffiana seedlings rescued from areas of suppression of the “Rodoanel Mário Covas” - North Section - and transplanted in natural areas of the Cantareira State Park, São Paulo, SP state. Measurements of height, stem diameter, number of leaves and clod volume of seedlings were obtained. The transplant was carried out in three light conditions after being separated into three clod volume classes and three crown diameter classes and observed for one year. The percentage of survival increase in height, crown diameter, number of leaves and photosynthetic pigments were evaluated. The experimental design was completely randomized in a 3 x 3 x 3 factorial scheme (luminosity x crown diameters x clod volumes) with three replications of five plants each. The data obtained were subjected to analysis of variance and the means compared to each other using the Tukey test (5%). Survival was over 80% in all environments. There was greater growth, mainly regarding the stem diameter, in the small clearing. The quantification of chlorophyll a, b and carotenoids, showed higher pigments content for plants kept in the shade. As for the chlorophyll a/b ratio, the results showed a greater relationship in plants kept in shade, with increasing values up to 12 months. It can then be concluded that S. romanzoffiana has little restriction on the relocation environment, but with preference for small clearings, and it is unnecessary that they are relocated with large clod.

RESUMO Ananas comosus var. ananassoides (Baker) Coppens & F.Leal é uma bromélia ornamental nativa do Cerrado, um bioma ameaçado de extinção, sendo necessários estudos para sua preservação, como o uso de micropropagação. O nutriente nitrogênio (N) é absorvido pelas plantas, principalmente, como NO3- e/ou NH4+ e é assimilado em aminoácidos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a assimilação de N nesta bromélia. As plantas foram cultivadas in vitro por sete meses em meio MS modificado com 15, 30, 60 e 90 mM de N como NO3-, NH4+ ou NH4NO3, depois as plantas foram aclimatizadas ex vitro. Plantas cultivadas com NH4+ tiveram alta mortalidade. Durante a aclimatização, plantas cultivadas com 30, 60 e 90 mM de N como NH4NO3 apresentaram maior biomassa. Em relação à assimilação do N, GS e NR apresentaram as maiores atividades em plantas cultivadas com NH4NO3, e as adubadas apenas com NH4+ tiveram alta atividade da GDH. Consequentemente, recomenda-se cultivar esta espécie in vitro e ex vitro com 60 mM de N como NH4NO3.

ABSTRACT Ananas comosus var. ananassoides (Baker) Coppens & F.Leal is a native ornamental bromeliad of the endangered biome Cerrado. Therefore, approaches aimed at the preservation of this species, such as in vitro cultivation and micropropagation are needed. Nitrogen (N) is absorbed by plants, mainly as NO3- and/or NH4+, and assimilated into amino acids. The aim of this work was to evaluate the N assimilation in this bromeliad. Plants were grown in vitro for seven months in modified MS medium with 15, 30, 60, and 90 mM of N as NO3-, NH4+ or NH4NO3, and then transferred to ex vitro conditions for acclimatization. Plants grown with NH4+ had high mortality. During acclimatization plants cultivated with 30, 60, and 90 mM of N as NH4NO3 showed higher biomass. With regard to N assimilation, GS and NR showed the highest activity in plants cultivated with NH4NO3, whereas plants cultivated with NH4+ had the highest GDH activity. Consequently, in vitro and ex vitro cultivation of this species with 60 mM N as NH4NO3 is recommended.

Resumo A deiscência não simultânea dos frutos de bromélias deve ser considerada para fins de propagação por sementes. O objetivo deste estudo foi avaliar o melhor método para produção de plantas da bromélia imperial considerando a colheita simultânea das sementes de diferentes posições do escapo floral no período da deiscência dos frutos da base e seu armazenamento para posterior uso na obtenção de plantas. As sementes foram colhidas da base, meio e topo do escapo floral e armazenadas por 26, 61, 154 e 213 dias a 10 °C e a 25 °C. Foram avaliadas a emergência de plantas em gerbox com papel de filtro e a germinação e crescimento in vitro com 10, 20 e 30 g.L-1 de sacarose. As sementes colhidas da base e armazenadas por até dois meses a 10 °C foram as que apresentaram maior porcentagem de emergência de plantas (57%) e a melhor concentração de sacarose para germinação in vitro foi de 10 g.L-1 e para o crescimento, 20 g.L-1. Considerando-se a vulnerabilidade desta bromélia, o aproveitamento, ao mesmo tempo, das sementes de todo o escapo floral pode ser uma estratégia de conservação.

Abstract Non-simultaneous dehiscence of bromeliads fruits should be considered for seed propagation purpose. The aim of this work was to evaluate the best method for the production of imperial bromeliad plants considering the simultaneous harvesting of the seeds of different positions of the floral scape in the period of base fruits dehiscence and its storage for later use in the production of plants. Seeds were harvested from the base, middle and top of the floral scape and stored for 26, 61, 154 and 213 days at 10 °C and 25 °C. Plants emergency were evaluated in gerbox with filter paper, and in vitro germination and growth with 10, 20 and 30 g.L-1 of sucrose. Seeds harvested from the base and stored for up to two months at 10 °C showed the highest percentage of plants emergence (57%). The best sucrose concentrations for in vitro germination was 10 g.L-1 and for plant growth 20 g.L-1. Considering the vulnerability of this bromeliad, the use of the seeds of all the floral scape can be a conservation strategy.

(Cultivo in vitro em temperatura baixa e aclimatização ex vitro de Vriesea inflata, uma bromélia ornamental). O cutivo in vitro iniciado a partir de sementes pode ser utilizado para preservação de espécies ameaçadas porque contribui para o fornecimento de um grande número de plantas com diversidade genética. Vriesea inflata (Wawra) Wawra, uma bromélia ornamental, é extensivamente e ilegalmente coletada da natureza, sendo importante sua preservação. Por meio do cultivo in vitro é possível formar coleções de plantas ameaçadas, sob crescimento lento, ocupando pouco espaço, com redução dos custos de manutenção das culturas. Este trabalho avaliou a influência da temperatura sobre o crescimento e morfologia de plantas de V. inflata mantidas in vitro, com objetivo de diminuir o crescimento, além de verificar a aclimatização destas para a condição ex vitro. Sementes de V. inflata foram germinadas utilizando-se o meio de Murashige and Skoog (MS) com macronutrientes reduzidos à metade (MS/2). Após três meses as plantas foram transferidas para frascos contendo o mesmo meio e mantidos em câmaras de germinação, com temperaturas ajustadas para 15 °C e 28 °C. Após 24 meses essas plantas foram submetidas à analises biométricas, anatômicas e de pigmentos fotossintéticos. Verificou-se que as plantas mantidas a 15 °C foram menores que aquelas cultivadas a 28 °C. A taxa de sobrevivência foi de 100% e não houve alterações no conteúdo de pigmentos e na anatomia. Este trabalho mostrou que plantas dessa espécie podem ser mantida in vitro a 15 °C com o objetivo de se estabelecer uma coleção de crescimento lento visando à preservação, além de mostrar que essas plantas apresentaram uma taxa de 100% de sobrevivência quando transferidas para condições ex vitro.

(In vitro culture at low temperature and ex vitro acclimatization of Vriesea inflata an ornamental bromeliad). In vitro culture by seeds is a technique for preservation of threatened species because it may provide a large number of plants with genetic diversity. The bromeliad Vriesea inflata (Wawra) Wawra, an ornamental bromeliad, is extensively and illegally collected from the nature and must be preserved. It is possible to form plant threatened collections in vitro by reducing the temperature of culture, while occupying little space, with the consequent reduction of maintenance costs. This work evaluated the influence of temperature on in vitro growth and morphology of plants of V. inflata, with the aim of establishing a slow growth-rate and analyzing the ex vitro acclimatization. Seeds were germinated in vitro in Murashige and Skoog (MS) medium, with macronutrients reduced to 50% (MS/2). After three months the plants were transferred to flasks of new same medium and kept in two germination chambers with the temperature adjusted to 15 °C and to 28 °C. After 24 months the plants were subject to biometric, photosynthetic pigments content and anatomical analyses. Results showed that plants maintained at 15 °C were smaller than those at 28 °C. Nevertheless, there were no alterations in pigments content, anatomy. In both treatments there was a survival rate of 100%. This work showed that plants of this species can be kept in vitro at 15 °C with the aim of forming a slow-growth collection, thereby seeking its preservation, and can be transferred to growth at ex vitro condition to achieved 100% survival rate.

As fontes antropogênicas de amônia atmosférica têm se tornado um problema sério para a vegetação natural. No presente trabalho foram analisados os efeitos da aplicação de diferentes fontes amoniacais sobre o metabolismo do nitrogênio de Tillandsia pohliana, uma bromélia atmosférica. As sementes foram germinadas in vitro e as plantas cresceram em meio de cultura de Knudson por um ano. Após esse período, elas foram transferidas para o meio de Knudson sem as fontes nitrogenadas originais. Três semanas depois, as plantas foram colocadas nesse mesmo meio de cultura, porém, suplementado com 0,5, 1,0 ou 1,5 mM de N nas formas de NH3 ou NH4+ como fontes únicas de nitrogênio. O tempo de exposição a essas fontes foi de 40 h. As atividades enzimáticas da glutamina sintetase (GS) e da glutamato desidrogenase (GDH-NADH) foram analisadas. Os teores endógenos de amônio, de aminoácidos livres e de proteínas solúveis, presentes nos eixos caulinares dessa bromélia, também, foram determinados. As atividades da GS e da GDH-NADH foram estimuladas, significativamente, com o aumento do nitrogênio na forma gasosa. Esses resultados podem refletir a rápida absorção de NH3 pela planta. Entretanto, a atividade aminante da GDH não apresentou diferença significativa em resposta ao aumento do N na forma de NH4+. Provavelmente, o incremento na atividade da GDH-NADH, no tratamento com NH3, está relacionado com a proteção das células aos possíveis efeitos tóxicos e altas concentrações endógenas de NH4+. O aumento na concentração do nitrogênio, especialmente na forma de NH3, elevou os conteúdos de aminoácidos livres e de proteínas solúveis. Uma possível aplicação prática para o presente trabalho é a utilização de T. pohliana como indicadora da variação da concentração de amônia atmosférica.

Increasing levels of atmospheric ammonia from anthropogenic sources have become a serious problem for natural vegetation. Short-term effects of different ammoniacal sources on the N metabolism of Tillandsia pohliana, an atmospheric bromeliad, were investigated. One-year-old, aseptically grown plants were transferred to a modified Knudson medium lacking N for three weeks. Plants were subsequently transferred to Knudson media supplemented with 0.5, 1.0, or 1.5 mM of N in the forms of NH3 or NH4+ as the sole N source. The activities of glutamine synthetase (GS) and glutamate dehydrogenase (GDH-NADH) were determined after 40 h. The GS activity was stimulated significantly by increasing the levels of the gaseous form. The GDH-NADH activity increased significantly under increasing N concentrations with NH3, while no significant differences were observed with NH4+ as a N source. These results may reflect a faster NH3 absorption by T. pohliana compared to NH4+ uptake. The increased activity of GDH-NADH in NH3 treatment may play a role in protecting the cells from the toxic effects of increased endogenous level of free ammonium. A raise in the concentration of N, especially in the form of NH3, greatly increased the content of free amino acids and soluble proteins. A possible utilisation of T. pohliana to evaluate the changes of atmospheric gaseous ammonia is proposed.